本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中內分泌腺來源的血管內皮生長因子（EG-VEGF）水平。用純化的人內分泌腺來源的血管內皮生長因子（EG-VEGF）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入內分泌腺來源的血管內皮生長因子（EG-VEGF），再與HRP標記的內分泌腺來源的血管內皮生長因子（EG-VEGF）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內分泌腺來源的血管內皮生長因子（EG-VEGF）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人內分泌腺來源的血管內皮生長因子（EG-VEGF）濃度。

樣品采集：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。ELISA原理實驗條件和技術要點

在應用ELISA時，首先要清楚下面內容：1，是檢測抗體還是抗原？2，檢測的結果是定性還是定量？3，是否需要檢測特異抗體的類型？4，所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣？

（1）檢測抗原 zui常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法，其次是競爭法。但競爭法在具體實驗中有些困難，特別是檢測微生物的抗原，因為需要標記抗原，這對于某些抗原是很難做到的，甚至是不可能的。另外在競爭法中，酶標記的抗原與標本直接混合在一起，許多標本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質，可影響ELISA的結果。

（2）檢測抗體檢測抗體種類常用的方法是檢測抗體種類的捕獲法，這個方法常用于檢測特異性IgG、IgA和IgM.。這個方法的*步是捕獲所需要檢測的一個種類的抗體，接下來是檢測捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。間接ELISA在檢測IgG時比較簡單，但不適用于檢測其他種類的抗體，因為血清中如果有特異IgG存在將與IgM或IgA等競爭結合抗原。

保存條件及有效期：

1.試劑盒保存：2-8℃。

2．有效期：6個月

本產品僅供科研使用咨詢 “人內分泌腺來源的血管內皮生長因子（EG-VEGF）ELISA試劑盒”產品詳細說明書。

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